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一代測序服務

服務介紹  Service Introduction



        艾基生物有近十年的 Sanger 測序經驗,針對樣品的復雜程度摸索出一系列的解決方案,并且在 Sanger 測序平臺的基礎上將應用擴展至分子生物學上游的多個領域,包括:SNP 檢測,片段分析, SSR/STR 分型, 基因檢測, 菌種鑒定, 線粒體測序, 基因組測序,跑板等服務。

 

 

平臺優勢  Service Advantages



        質量穩定:精確讀長達 800 bp 以上,有效讀長度超過 900 bp。

        準確度高:QV20+ 和 CRL 值 >1000。

        時效性強:日均處理量 >2000 個反應,結果及時、準確,最快 24 小時出結果。

        困難模板:成熟的方案應對 High GC,AT rich,發夾結構,重復序列。

        一站式服務:基因組提取、引物設計、PCR 擴增、Primer Walking、測序及結果分析。

 

技術流程 Technical Procedures





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樣品要求 Sample Requirenments


  

      【菌液和平板】

        需過夜培養的菌液,至少提供 200 ul;無需培養可直接提取的樣品,請提供 2-4 ml 過夜培養的菌液;

        樣品請注明抗性,常備抗生素:氨芐青霉素 (Amp)、卡那霉素 (Kan)、氯霉素 (Chl);

        若菌液所含質粒為超低拷貝,請直接提供質粒;

        除大腸桿菌以外的菌液,請直接提供質粒。

        【質?!?/span>

        濃度 >50 ng/ul,總體積不少于 10 ul;

        請確保質粒溶解于滅菌的雙蒸水中,TE 溶解的質粒會造成反應失敗。

        【PCR 產物】

        已純化 PCR 產物:請確保 DNA 溶解于滅菌的雙蒸水中,濃度 >30 ng/ul,總體積不少于 20 ul。

        未純化 PCR 產物:請注明片段長度,條帶是否單一,原液總體積不少于 20 ul;

        片段 < 100 bp 建議克隆后測序,片段 > 4 kb 建議分段擴增后測序。

        【測序引物】

        濃度 ≥ 5 pmol/ul,總體積不少于 10 ul,并確保溶解于滅菌的雙蒸水中;

        測序引物長度盡量控制在 20-30 bp,引物過短或過長均會影響測序質量;

        含兼并堿基熒光標記或修飾的引物不適用于測序。


 

注意事項  Notes



         kyfwtx.png 樣品登記表需按要求填寫詳細,避免問題訂單帶來的實驗延誤;

         kyfwtx.png 確保樣品與登記表名稱一致,可包含“字母”“數字”“—”;請避免出現 漢字、拉丁字母及其他特殊字符;

         kyfwtx.png 填寫“測通”的樣品會默認拼接,“雙向”測序的樣品如需拼接請注明;

         kyfwtx.png 如樣品為菌液或平板,請注明抗生素類型;

         kyfwtx.png 若測序引物不是通用引物,請自備或委托合成,選擇引物類型(通用 / 新送 / 已送 / 需合成)并注明濃度;

         kyfwtx.png 若送測質粒不是常用載體,通用引物請寫明引物全稱;

         kyfwtx.png 未純化 PCR 產物若已檢測為單一條帶,請在訂單中注明,可大大提高測序成功率;

         kyfwtx.png 存在特殊結構的,如:High GC、AT rich、重復序列、發夾結構請在訂單上備注;

         kyfwtx.png 大量樣品送測時,請使用電子訂單,方便核對且不易出錯。

 


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